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黄曲霉毒素M1与赭曲霉毒素A联合作用诱导分化Caco-2细胞凋亡的机制
发布时间：2019/11/5 9:45:48 浏览次数：1036
黄曲霉毒素M1 赭曲霉毒素A 凋亡 分化的Caco-2细胞
目的:研究了黄曲霉毒素M1（Aflatoxin M1,AFM1）和赭曲霉毒素（ochratoxin A,OTA）交互作用诱导分化人结肠癌Caco-2细胞凋亡及其作用机制。方法:AFM1和OTA单独及联合作用于分化的Caco-2细胞后,通过阿尔玛蓝（Alamar-Blue）法测量细胞存活率,研究AFM1和OTA对细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞术检测细胞凋亡率,活性氧荧光探针检测细胞活性氧（ROS）释放量,JC-1线粒体膜电位荧光探针检测细胞线粒体膜电位变化。蛋白免疫印迹法检测凋亡蛋白Caspase-3和Caspase-9的表达水平。结果:AFM1和OTA可抑制分化的Caco-2细胞增殖并诱导其凋亡,单独使用12μmol/L AFM1和6μmol/L OTA作用于细胞存活率分别为95.59%和93.14%,联合作用下细胞存活率为81.57%,提示联合作用具有协同作用;AFM1和OTA单独处理细胞24 h后,细胞的凋亡率分别为25.68%和33.7%,联合作用细胞的凋亡率为37.4%;AFM1和OTA单独作用下细胞ROS的释放量分别是空白对照组的1.37倍和1.79倍,交互作用是空白对照组的6.21倍,交互作用对活性氧的释放量明显增加。结论:线粒体膜电位和线粒体相关凋亡蛋白的表达水平变化,说明AFM1和OTA可能通过线粒体途径诱导分化的Caco-2细胞凋亡。
